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CircRNA pull-down試劑盒簡介

輝駿生物自主研發的 circRNA pull-down 試劑盒（已獲得國家知識產權局發明專利授權），利用“F2標簽”與其特異性配體的強親和力，高效調取細胞中的目標cirRNA及其結合蛋白。F2標簽是一段短的RNA序列，與目標circRNA連接后，幾乎不影響其結構和功能。

實驗前先將F2標簽序列與目標circRNA序列連接，構建成F2-circRNA過表達載體，轉染并裂解目的細胞，之后采用特異性配體磁珠來調取F2-circRNA及其結合蛋白。去除未結合的蛋白后，可以采用多種方法洗脫蛋白質。分離的蛋白產物既可以用Western blot檢測已知蛋白，也可以用質譜（LC-MS/MS）鑒定未知蛋白。

CircRNA Pull down試劑盒應用

蛋白-蛋白間的相互作用是蛋白質發揮生物學功能的主要模式，蛋白質會通過結合不同的伙伴來行駛不同的功能，形成復雜的信號轉導網絡。以下列舉了可應用pull down試劑盒的幾個研究方向或研究領域：

1. 確定2個蛋白是否具有直接相互作用；

2. 確定蛋白之間結合的結構域；

3. 病毒、細菌等病原體侵染宿主細胞的機制；

4. 酶和底物的作用機制；

5. 蛋白調控復合體的研究。

CircRNA Pull down試劑盒優勢

1、調取效率高：F2標簽序列與F2配體磁珠具有很強親和力，能夠高效調取F2-circRNA及其結合蛋白；

2、不受circRNA接口處序列限制，適用于各種序列的circRNA；

3、F2標簽很短，只有16nt，幾乎不影響目標RNA的結構或功能；

4、洗脫液適配后續Western Blot及質譜（LC-MS/MS）實驗。

5、操作簡便，耗時短，適用于初學者。

CircRNA-pulldown試劑盒使用流程簡述

1. 構建F2-circRNA表達載體，轉染目標細胞并進行表達檢測；

2. 裂解樣本，同時制備F2配體磁珠；

3. 將細胞裂解液加入F2配體磁珠中，4 ℃孵育2~4 h；

4. 漂洗、洗脫得到目標蛋白及其互作蛋白復合物。

CircRNA pulldown試劑盒使用案例

circrna pulldown WB結果圖（陽性）

circrna pull-down MS：質譜檢索表格（部分展示）

circrna pull down試劑盒—客戶文章

1. Fumarate induces LncRNA-MIR44352HG to regulate glutamine metabolism remodeling and promote the development of FHdeficient renal cell carcinoma. Cell Death and Disease. 2024. IF=9.2.

2. A positive feedback between PDIA3P1 and OCT4 promotes the cancer stem cell properties of esophageal squamous cell carcinoma. Cell Communication and Signaling. 2024. IF=8.4.

3. Min X.L. et al: miR-758-3p Interferes with Neuronal Apoptosis in Cerebral Ischemia–Reperfusion by Inhibiting ILK. 2025. 2區, IF=4.3.

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