欧美亚洲国产另类久久久-亚洲一级午夜精品福利免费看-国产亚洲中文字幕啪啪-日韩美免费毛片一区二区三区-亚洲国产中文在线二区三区免-中文字幕av久久日-亚洲欧美精品高清一区二区三区-国产欧美日韩六区-亚洲手机av不卡一区在线-国产一区精品二区三区四区

2024年11月12日，復旦大學附屬腫瘤醫院余科達教授團隊在Journal of Clinical Investigation（IF=13.3）發表了題為“MAP3K1 mutations confer tumor immune heterogeneity in hormone receptor-positive HER2-negative breast cancer”的研究論文。

非常榮幸，輝駿生物產品RIP試劑盒（原貨號：FI88707，更新后的貨號：FI8709)助該研究一臂之力。

HR+/HER2-（激素受體陽性/人表皮生長因子受體2陰性）乳腺癌是最常見乳腺癌類型，其免疫療法研究尚處早期階段。研究者發現HR+/HER2-乳腺癌具有高度異質性的腫瘤免疫微環境，且與MAP3K1（有絲分裂原激活蛋白激酶激酶1）突變相關，MAP3K1突變可減弱CD8+ T細胞介導的抗腫瘤免疫。

機制研究表明：MAP3K1突變促進了TAP 1/2(抗原肽轉運蛋白1/2) mRNA降解，進而抑制MHC-I介導的腫瘤抗原呈遞，驅動腫瘤免疫逃逸。在臨床前模型中，酪胺可逆轉MAP3K1突變誘導的MHC-I減少，增強免疫治療療效。

該研究揭示了驅動HR+/HER2-乳腺癌免疫異質性的重要生物標志物MAP3K1，并闡明了其分子機制，這為利用酪胺增強免疫治療療效的新策略提供了依據。

（1）體內和體外實驗證實：MAP3K1基因與HR+/HER2-乳腺癌免疫異質性密切相關，MAP3K1突變（MAP3K1-mut）的腫瘤細胞能抑制CD8+ T細胞介導的免疫。

（2）RNA-seq等實驗發現MAP3K1-mut腫瘤中的MHC-I抗原呈遞通路顯著下調，TAP 1和TAP 2是其中的關鍵基因，過表達Tap 1/2可以有效地挽救腫瘤細胞表面MHC-I表達的下調。

（3）RT-qPCR實驗表明MAP3K1-mut在轉錄后水平抑制Tap 1/2表達，因MEKK1并非RNA結合蛋白（RBP），猜測可能有另外一種分子使Tap 1/2 mRNA不穩定，故通過RNA pull-down與IP實驗篩選可結合Tap 1/2 mRNA且與MEKK1互作的RBP。

（4）接下來分析兩項檢測的蛋白交集，鎖定RNA代謝相關的DDX17（DEAD盒解旋酶17）；通過RNA下拉實驗表明Tap 1/2 mRNA與DDX17直接結合，且Co-IP結果顯示Map3k1-Mut與DDX17結合減少。

研究者使用輝駿生物“RIP試劑盒”進行RIP（RNA免疫沉淀）實驗，發現MAP3K1-mut顯著增強了DDX17與Tap1/2 mRNA的結合（圖1E）。支持“MAP3K1-WT結合DDX17可抑制其降解Tap 1/2 mRNA”的推測。

（5）通過siRNA（siDdx17）挽救實驗、免疫熒光等進一步確認：MEKK1突變抑制其與DDX17的結合，促進DDX17介導的Tap1/2 mRNA降解。

（6）鑒于MAP3K1-mut可下調MHC-I重塑免疫微環境、促進腫瘤生長，且酪胺（Tyra）臨床轉化潛力大，研究者將其應用于體外共培養系統，發現Tyra可逆轉MAP3K1-mut腫瘤細胞表面MHC-I及OVA抗原下調，增強CD8+ T細胞活化。

（7）小鼠模型實驗顯示：單獨抗PD-1治療抑瘤效果有限，而Tyra聯合抗PD-1治療可強效抑制腫瘤生長，且該聯合方案能顯著提升腫瘤組織CD8+ T細胞浸潤與活化。

使用產品：RIP試劑盒（由輝駿生物Fitgene提供產品和技術支持）