無論藥物研發還是基礎科研,檢測化合物(如小分子藥物)與蛋白質之間的相互作用都是一類重要的實驗。化合物pull down是體外研究化合物與蛋白質相互作用的方法。利用生物素與鏈霉親和素之間的高親和力,可以從各種類型目標樣本中調取目標化合物的結合蛋白。
生物素標記的化合物先與鏈霉親和素磁珠孵育,之后與樣本蛋白液孵育,目標化合物及其結合蛋白便一起吸附在磁珠上。洗滌去掉未結合的蛋白后,用洗脫液將結合蛋白從磁珠上洗脫下來,之后可以采用Western Blot技術檢測特定的結合蛋白,還可以采用質譜方法鑒定與目標化合物結合的未知蛋白。
化合物 pull down WB
(驗證型)
實驗樣本
生物素標記的化合物和單生物素對照
待測蛋白抗體
實驗信息表
pull-down捕獲生物素標記化合物及其結合蛋白
Western blot檢測圖
pulldown實驗報告
化合物 pull down MS
(篩選型)
pulldown捕獲生物素標記化合物及其結合蛋白
SDS-PAGE銀染檢測圖
pull-down實驗報告
質譜檢索結果及報告
互作蛋白篩選表格
生信分析結果和報告
▲注意:以上均為每組樣本的送樣量,如果實驗和對照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細送樣指南可聯系輝駿生物索取。
保存及運輸:-80℃保存,干冰取樣/運輸,至少在送樣前2天通知我司。
藥物Pull down MS產物銀染圖
藥物Pull down MS質譜檢索表格(部分展示)
潛在結合蛋白的生物信息學分析結果(部分展示)
Chen X. et al: Celastrol induces ROS-mediated apoptosis via directly targeting peroxiredoxin-2 in gastric cancer cells. Theranostics. 2020.
使用相關技術:RNA pull down MS、小分子pull down、化合物pull down、藥物pull down
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? LC-MS/MS 蛋白質譜鑒定
? DIA 全息掃描定量蛋白質? 廣泛靶向代謝組學
? RNA pull down
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